|
● پیش زمینه و هدف:
لوکوسیت خون محیطی گاو در اثر ویروس ها اینترفرون ترشح می کنند. این اینترفرون می تواند در عفونت های ویروسی گاوی مورد استفاده بالینی قرار گیرد. به همین دلیل برای خالص سازی و بازیافت بیشتر اینترفرون گاوی به روشی مناسب نیاز می باشد.
● مواد و روش ها:
اینترفرون لوکوسیت خون محیطی گاو که در اثر تحریک با سندای ویروس تولید شده به کمک پتاسیم تیوسیانید در ۳.۵ pH رسوب داده شد و با کروماتوگرافی ستونی سفادکس ۱۰۰ ، همراه با اتیلن گلیکول خالص گردید. برای بازیافت و خلوص بیشتر اینتروفرون از ارزش الکتروفورز (SDS PAGE) استفاده شد.
یافته ها: استفاده از ۲۵% اتیلن گلیکول و یک مولار نمک طعام در بافر کروماتوگرافی ستونی باعث بازیافت بیش از ۹۳% فعالیت اینترفرون شد، در حالی که بدون افزایش اتیلن گلیکول فقط ۲۵% فعالیت اینترفرون حاصل شد. اینترفرون خالص شده توسط الکتروفورز مورد بررسی قرار گرفت و یک باند ۱۹ کیلو دالتونی که فعالیت اینترفرون داشت به دست آمد.
● بحث و نتیجه گیری:
این روش برای تولید مقدار مناسب اینترفرون خالص طبیعی جهت تولید منوکلنال آنتی بادی در مطالعات بیولوژیکی مناسب می باشد. |